蛋白小分子复合物结构解析
蛋白质-小分子复合物的结构分析对于理解蛋白质功能、药物设计以及分析生物分子相互作用具有重要意义。X 射线晶体学作为测定蛋白质三维结构的技术,是开展这些研究的关键工具。X 射线晶体学研究中,蛋白质结晶是让蛋白质形成结构化、有序晶格的过程,这也是决定蛋白质结构能否成功解析的关键环节。
共结晶法
共结晶是将蛋白质与其他生物分子(即配体,如核酸、酶、小分子及其他蛋白分子等)混合,制备复合物,常用的结晶方法如坐滴法和悬滴法,通过自动化点晶机器人进行高通量筛选,获得复合物晶体。
浸泡法
获得蛋白质-小分子复合物结构的一种常用技术。
将已经生长好的蛋白质晶体放入含有小分子配体的溶液中,让配体分子通过晶体的溶剂通道扩散进入晶体内部与蛋白质产生特异性结合,浸泡后的晶体在X射线下进行数据收集,解析得到复合物结构。相比较共结晶法,浸泡操作更为简便、成本较低。