佰翱得MicroED技术服务助力新药研发

微晶电子衍射（MicroED）是一种新兴的小分子结构解析技术。它是通过冷冻电镜获得小分子微晶的衍射图谱，从而解析小分子的高分辨结构（好于1.0埃）。MicroED技术在药物晶型鉴定、天然产物结构鉴定以及CMC过程中的杂质鉴定等领域有着巨大的应用前景，因而此技术引起了药物研发行业的极大兴趣。 X-ray单晶衍射技术作为小分子结构晶型鉴定的金标准，其痛点在于所需单晶尺寸（>几百微米）培养难度大、耗时长且具有不确定性。很多小分子只能形成纳米级别的晶体，x-ray单晶衍射技术对于如此小的晶体无能为力，而MicroED技术则可直接利用这些纳米级微晶来鉴定结构，完美的跳过了x-ray的技术痛点。很多小分子化合物在生产的过程中会自发形成微晶，通过MicroED技术可直接得到其结构和晶型。以X项目为例，我们通过碾碎药片获得微晶，成功鉴定了此药物的结构和晶型；同时根据合成过程中的杂质粉末，确定了此杂质的结构，整个项目仅耗时3天。 小分子药物晶型鉴定    杂质的结构鉴定   晶型对药物稳定性、工艺可开发性以及生物利用度有直接影响，而且药物的晶型也可以申请专利保护，以此延长新药的市场保护期。MicroED特有的技术优势必将为药物晶型鉴定领域的发展带来新的力量。此外，MicroED技术还有样品用量少（远少于x-ray所需）、反馈快（甚至当天出结果）等优点，这对于那些低产量小分子的结构鉴定非常实用。例如某些天然产物或CMC过程中产生的杂质等，只需少量（约1mg）微晶，即可快速获得其结构和晶型。 佰翱得生物作为世界上首批提供MicroED商业服务的公司之一，已经建立了成熟高效的技术流程，且已向客户交付了众多高分辨率的小分子结构。佰翱得作为世界上唯一一家从基因合成到蛋白表达再到晶体与冷冻电镜结构解析一站式服务的CRO公司，将继续竭诚为全世界药企的药物研发提供精准的服务。

释放电镜潜力，赋能新药发现-佰翱得首席运营官金雷博士应邀将出席首届《冷冻电镜与药物发现》创新峰会

2020年8月15日13:00-17:00，水木未来公司将携手赛默飞科技，邀约国内外学术科研机构、产业链上下游企业、产业园区、投资机构的多位专家，线上举办首届《冷冻电镜与药物发现》创新峰会。佰翱得金雷博士应邀担任峰会嘉宾，将与各方同道，共商共话新兴的冷冻电镜技术在新药发现领域的潜力和应用，特别是探讨达到原子分辨水平后，冷冻电镜在测定药靶结构上的独特优势，在膜蛋白和多蛋白复合物结构测定上的突破所带来的广泛机遇和对新药研发的深远影响，以加速赋能研发企业，更快更好地造出患者所急需的新药。 金雷博士于1999年从英国剑桥大学获结构医学博士学位，2004年在哈佛大学完成了博士后训练，取得了令人瞩目的科研成果。2017年，祖籍江苏的金雷博士回到故土，加入无锡佰翱得生物科学有限公司，担任首席运营官。他将国际领先的冷冻电镜技术引入新药研发领域，使测定药靶蛋白结构的速度比传统方法快了十倍以上，让药靶结构解析更能契合新药研发的节奏，解决了长期以来制约新药研发的痛点，在为全球生物医药企业提供商业化的冷冻电镜服务的同时，也促进了药靶结构测定服务行业的升级换代。    金雷博士在电镜实验室   现代原创新药物研发离不开药靶及其复合物的原子分辨率三维结构。传统结构测定所用的X-射线晶体学技术必须制备晶体，这大大限制了结构解析速度，跟不上新药研发的节奏。近年来兴起的革命性的新技术―高分辨率冷冻电镜，正在取代晶体学而成为行业的金标准，将极大丰富和改观创新药物研发的今后30年，也会颠覆性地改变药靶结构测定行业，正如数码相机取代胶卷相机一样，将造成行业的重新洗牌。 比如膜蛋白是细胞膜的组成部分，在能量转换、物质运输、信息识别和传递等活动中执行重要的功能。在医药领域，大于50％的药物靶标是膜蛋白。鉴于膜蛋白在生命活动和医药研究中的重要性，其高分辨三维结构研究，一直是新药研发中的热点。但由于膜蛋白丰度低、疏水性强、在非膜环境下稳定性低和不易结晶等特点，其高分辨结构研究更是难点。为了满足新药研发的需要，亟需一个没有技术瓶颈的普适手段,可常规地、快速地对膜蛋白进行高分辨率的结构测定。 于是，冷冻电镜技术(cryo-EM)测定膜蛋白三维结构便应运而生。单颗粒cryo-EM(single-particlecryo-EM)，所需样品少(微克级即可)，无需结晶而且是在更接近生理条件的溶液状态下直接观察，因而对膜蛋白结构研究有着独特的优势，并且为功能多态性和构象动力学研究提供了极大的技术潜能。 自1997年单颗粒cryo-EM达到亚纳米分辨率以来，特别是近十年，电镜技术本身得到了长足的进步，比如，更稳定的电子束、直接电子探测器、电子能量过滤以提高信噪比、应用相位板以提高衬度、自动数据收集、更强大的计算能力和更新颖的图形处理算法。这些已将单颗粒cryo-EM推至原子分辨水平，使其异军突起，一跃上升为能与X-射线晶体学相媲美而并驾齐驱，甚至后来居上的主流技术。在佰翱得近期为客户完成的高分辨率冷冻电镜结构中，从密度图上就能够清晰地看到药靶和药物小分子的相互作用。 另外，近年来，微晶电子衍射(MicroED)技术逐渐成熟，因其只用纳米级晶体便能测定出高分辨率结构而大放异彩。应用MicroED进行小分子晶型和结构测定在药物发现、临床前药代、CMC和制剂等诸方面也有广泛的前景。   无锡佰翱得是全国500强双良集团旗下生物医药板块的子公司，聚焦基于结构的新药研发CRO服务，是高端结构生物学细分领域的全球化领军企业。佰翱得公司抓住冷冻电镜的颠覆性的机遇，组建世界一流团队，成为了国内第一家为新药研发工业界提供冷冻电镜服务的CRO公司，是世界上唯一集成了从基因到蛋白表达、纯化，到冷冻电镜结构测定的一体化服务的CRO公司，也是世界上唯一能同时提供X射线和冷冻电镜两大技术的公司，在行业细分领域独具领先地位。经过多年努力，佰翱得品牌在业界已经形成。目前，佰翱得正发挥先发优势，整合资源，不断扩大客户群，服务全球药物研发大药企和新兴生物技术公司，每年业务均保持高速增长。  佰翱得电镜专家颜晓东博士指导工作  报名方式一: 扫描下方二维码加入会议微信群，抢先预约精彩学术盛宴！  报名方式二: 扫描下方二维码访问会议网站参与报名，了解更多会议信息！

“解密”帕金森病药靶的结构 — 佰翱得提供高质量全长LRRK2蛋白

帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)是第二大最常见的神经退化性运动障碍疾病。在65岁以上的人群中约有1-2%的人受此病影响。目前尚无有效的帕金森氏病的治疗方法。蛋白激酶Leucine-richrepeatkinase2(LRRK2)与帕金森病的病理有高度关联性，也是帕金森病药物治疗中最有希望的药靶之一。现在有几种LRRK2抑制剂正处于临床试验阶段。 LRRK2是一种大型多结构域蛋白，具有2527个氨基酸(分子量：286kDa)，由armadillorepeats(ARM),ankyrinrepeats(ANK),leucine-richrepeats(LRR),Rasofcomplex(ROC),C-terminalofROC(COR),kinasedomain(KD)和WD40domain组成，以二聚体形式存在。尽管高分辨的三维结构在LRRK2的机理阐明和药物发现中具有重要意义，但由于表达和纯化困难，全长LRRK2的高分辨率三维结构一直难以得到测定。 　　冷冻电镜(cryoEM)是一种新兴的可以获得高分辨率蛋白结构的强大方法。近年来，佰翱得一直致力于制备能满足冷冻电镜结构测定需求的高纯度、高质量的LRRK2蛋白。我们尝试了多种方法和条件，诸如真核细胞表达系统和蛋白标签的选择，表达和纯化方案，冷冻电镜样品条件筛选等等。迄今，我们已经成功表达纯化了高质量的全长二聚体LRRK2蛋白，从而为高分辨率冷冻电镜结构研究以及功能性检测奠定了坚实的基础。欢迎学术界和工业界的研究人员与我们联系，以获取高质量的全长LRRK2蛋白，并进而获得其高精度的三维结构信息，包括LRRK2与其抑制剂的复合物的结构信息。 图一.SDS-凝胶电泳胶图：全长LRRK2蛋白的纯化 FLAG标记的LRRK2，由转染HEK293细胞表达，经亲和层析和凝胶过滤纯化。(M=分子量标记;泳道1=全细胞蛋白;泳道2=沉淀;泳道3=上清液;泳道4=亲和柱的穿透峰;泳道5=亲和柱的缓冲液洗涤;泳道6=从亲和柱上洗脱的LRRK2蛋白。 　　图二：全长LRRK2颗粒的电镜图像 在FEITF20200kV显微镜下的LRRK2负染图像，醋酸铀(UA)染色。圈出的单颗粒显示了全长LRRK2的紧凑和特征性图像。

佰翱得提供关键新冠蛋白和相关服务

在全球抗击新冠病毒的共同努力中，佰翱得竭力为科学界和工业界提供多种产品和服务，以协助研究人员寻找有效的抗病毒治疗方法。 利用其完善的蛋白质生产平台，佰翱得制备了多种高纯度的新冠非结构蛋白（NSP），包括NSP12（又称RNA-依赖性RNA聚合酶，RdRp，最关键的药物靶标之一），以及NSP5（3CLPro，新冠的主要蛋白酶）。下图的SDS-PAGE结果显示佰翱得的NSP系列蛋白具有高纯度，适用于不同的研究目的。同时，佰翱得还提供各种NSP复合物的定制生产，包括NSP蛋白之间的复合物，与其他蛋白质/肽的复合物，以及和小分子的复合物。此外，佰翱得还生产了新冠的S蛋白及其相关受体ACE2。  结构生物学是佰翱得公司的一项特长。对于关键药物靶标蛋白NSP5，佰翱得已成功制备了其晶体。我们的常规服务之一是通过共结晶或浸泡来筛选小分子，然后通过结构晶体学获得其复合物的结构。我们欢迎研究人员与我们联系以提供这些蛋白的晶体学研究。  如果您的蛋白是非结晶的，例如RNA-依赖性RNA聚合酶NSP12，佰翱得也可以提供解决这个问题的方案。我们经验丰富的冷冻电镜团队将为您获得非晶体蛋白及复合物的三维结构。我们自有的TF20电子显微镜可以方便地协助实现此过程，并且我们有保证的高端Krios的上机时间。 此外，佰翱得的生物分析团队开发并应用了多种体外分析体系以帮助我们的客户评估生物活性。通过我们的内部设置，例如BiacoreSPR（比如ACE2/刺突蛋白相互作用），ThermoFluor分析（比如筛选具有Tm位移的抑制剂），酶标仪（比如UV-Vis，FA，FP，HTRF）和荧光凝胶位移分析等等，佰翱得团队可以常规地评估包括新冠病毒在内的多种病原体的生物化学，生物物理和基于细胞的特性。我们参与的一项工作最近也在科学杂志上得到了发布(https://science.sciencemag.org/content/early/2020/04/30/science.abc1560)。 “从基因到结构”，佰翱得是专注于蛋白的CRO公司，我们在蛋白制备，体外药物筛选，和结构生物学领域竭诚为您的新药研发服务。

佰翱得助力研究新冠病毒药物瑞德西韦的药物机理，再次署名Science重磅文章

作为CRO公司，佰翱得常常以幕后工作者的身份为药物研发默默地做着贡献。作为一个具有创新精神的企业,佰翱得却会时常出现在高质量的科研成果发布中。自2019年10月因参与KCC1研究在Science上发表文章后，佰翱得团队再一次助力科研，在新刊的Science文章中又一次作为共同作者出现。这一次，佰翱得的生物分析团队协同中国医学科学院北京协和医院-清华大学医学院张抒扬课题组完成了新冠病毒复制酶活性的研

实力见证--佰翱得入选 “2019年度培育的江苏省研发型企业名单”

新年钟声刚刚敲响，佰翱得迎来了振奋人心的好消息：江苏省首次启动研发型企业培育项目，共有30家企业成功入选。其中无锡企业5家，无锡佰翱得生物科学有限公司作为江阴唯一1家企业光荣上榜！  此次成功获选“2019年度培育的江苏省研发型企业名单”，充分体现了各级政府对佰翱得在生物研发创新领域的认可。在双良集团的大力支持下，佰翱得致力于打造国际高端结构生物学领军品牌,努力夯实创新药物研发所必需的四个国际级技术平台,成为目前全国唯一、全球领先的一家具备从基因到蛋白到冷冻电镜结构全方位服务能力的CRO标杆企业。在新的一年里，佰翱得将持续专注于药物发现CRO最前端领域，勇立潮头、开拓创新，进一步促进企业高质量快速发展。